產(chǎn)品信息
名稱PUMC-HUVEC-T1(SV40T轉(zhuǎn)化人臍靜脈內(nèi)皮細(xì)胞)
種屬人
生長特性貼壁
細(xì)胞形態(tài)上皮細(xì)胞樣
背景描述PUMC-HUVEC-T1形態(tài)呈現(xiàn)為典型的鵝卵石樣排列,已證明在體外可傳至40代。PUMC-HUVEC-T1內(nèi)皮標(biāo)記vWF、CD31、CD34均陽性,可結(jié)合凝集素,電鏡下可見緊密連接和W-P小體,Matrigle上可形成管型。不同代數(shù)的HUVEC-T1細(xì)胞核型正常穩(wěn)定(P12、P13、P19、P38),裸鼠體內(nèi)接種不成瘤(P9和P33)。
生長培養(yǎng)基DMEM+0.01mg/mLInsulin+1%NEAA+10%FBS(164210)+1%P/S
推薦換液頻率2~3次/周
凍存條件凍存液:55%基礎(chǔ)培養(yǎng)基+40%FBS+5%DMSO溫度:液氮
培養(yǎng)條件氣相:空氣,95%;CO2,5%
運(yùn)輸和保存
可選擇干冰運(yùn)輸及發(fā)送復(fù)蘇存活細(xì)胞方式
?。?)干冰運(yùn)輸,收到后立即轉(zhuǎn)入液氮或者-80度冰箱凍存或直接復(fù)蘇;
?。?)存活細(xì)胞,收到后應(yīng)繼續(xù)生長,傳代達(dá)到細(xì)胞生長狀態(tài)良好時,再進(jìn)行凍存。具體操作見細(xì)胞培養(yǎng)步驟。
?。?)收到細(xì)胞后請拍照,3天內(nèi)如果發(fā)現(xiàn)污染,請及時拍照與我們聯(lián)系。
細(xì)胞用途:僅供科研使用。
細(xì)胞接收后的處理
1)收到細(xì)胞后,請檢查發(fā)貨培養(yǎng)瓶的狀況,若發(fā)現(xiàn)培養(yǎng)瓶破損、有液溢出及細(xì)胞有污染,請拍照后及時聯(lián)系我們。
2)在顯微鏡下確認(rèn)細(xì)胞生長狀態(tài)時,最,好在低倍鏡(4或5X物鏡)下進(jìn)行,能準(zhǔn)確判斷細(xì)胞的傳代密度??醇?xì)胞的形態(tài)請?jiān)?0X和20×物鏡下,同時給剛收到的細(xì)胞拍照,(10×,20×)各2-3張以及培養(yǎng)瓶外觀照片一張留存,作為細(xì)胞需要售后時提供收到細(xì)胞時細(xì)胞狀態(tài)的依據(jù)。
3)觀察好細(xì)胞狀態(tài)后,75%酒精消毒瓶壁將T25瓶置于37℃培養(yǎng)箱放置約2-3h。
4)貼壁細(xì)胞:在運(yùn)輸過程中貼壁細(xì)胞會有脫落的現(xiàn)象,如發(fā)現(xiàn)貼壁細(xì)胞有脫落或者脫落后抱團(tuán)生長,可將T25瓶置于37℃培養(yǎng)箱放置約2-3h,然后抽出瓶中的培養(yǎng)基和未貼壁細(xì)胞1000rpm離心5分鐘,棄去上清重懸后接種到加有按照說明書細(xì)胞培養(yǎng)條件新配制的*培養(yǎng)基的原培養(yǎng)瓶中(或新的培養(yǎng)瓶中)。
5)懸浮細(xì)胞:T25瓶置于37℃培養(yǎng)箱放置約2-3h,然后抽出瓶中的培養(yǎng)基和細(xì)胞1000rpm離心5分鐘,棄去上清重懸后接種到新的培養(yǎng)瓶中(加入按照說明書細(xì)胞培養(yǎng)條件新配制的*培養(yǎng)基)。