ClonePix 2 高通量細(xì)胞克隆篩選系統(tǒng)
新一代細(xì)胞克隆篩選和挑取技術(shù)。擁有5組熒光通道。避免有限稀釋，快速高效自動化篩選挑取雜交瘤克隆，建立穩(wěn)定細(xì)胞株，干細(xì)胞及特殊表面標(biāo)記細(xì)胞挑取及昆蟲細(xì)胞篩選挑取。
產(chǎn)品概述：
ClonePix 2 系統(tǒng)使用半固體培養(yǎng)基培養(yǎng)細(xì)胞，生長出單個(gè)的細(xì)胞克隆。細(xì)胞克隆表達(dá)的蛋白分泌到胞外和培養(yǎng)基里的熒光檢測試劑結(jié)合。表達(dá)蛋白越多，克隆周圍熒光強(qiáng)度越強(qiáng)。ClonePix 2 檢測的不是單個(gè)時(shí)間點(diǎn)的熒光強(qiáng)度。隨時(shí)細(xì)胞生長，蛋白表達(dá)的積累，軟件檢測的是整個(gè)培養(yǎng)周期內(nèi)所有蛋白累積的熒光值。適用于雜交瘤的篩選以及多種穩(wěn)定細(xì)胞系的篩選。
ClonePix 2 擁有白光和熒光兩套成像系統(tǒng)。白光成像識別克隆，熒光成像定量檢測克隆的熒光強(qiáng)度。軟件根據(jù)每個(gè)克隆的大小，外形，距離，熒光強(qiáng)度等參數(shù)對克隆進(jìn)行篩選。自動化機(jī)械臂可以挑取符合要求的克隆到96孔板。
ClonePix 2 系統(tǒng)可以統(tǒng)計(jì)計(jì)算每個(gè)克隆的平均熒光強(qiáng)度，根據(jù)熒光強(qiáng)度對所有克隆進(jìn)行排列，最后只挑取熒光符合要求的克隆。這個(gè)成像、統(tǒng)計(jì)計(jì)算、排列的過程就是代替?zhèn)鹘y(tǒng) ELISA 對克隆進(jìn)行初步篩選的過程。最關(guān)鍵的是整個(gè)篩選和挑取過程自動化。
主要特點(diǎn)：
1. 使用半固體培養(yǎng)基培養(yǎng)細(xì)胞，獲得獨(dú)立的單個(gè)細(xì)胞克隆
2. ClonePix 系統(tǒng)可以快速篩選上萬個(gè)克隆
- 大大增加找到克隆的概率
- 白光成像用于識別克隆位置
- 熒光成像用于定量表達(dá)水平
3. 多種檢測方法可選
- 不用標(biāo)記，直接檢測雜交瘤分泌的 IgG 或抗原特異性 MAbs
- 檢測加入標(biāo)記的重組蛋白或表達(dá)的熒光標(biāo)記蛋白
4. 客觀的成像分析，使用戶可以準(zhǔn)確篩選到表達(dá)水平的克隆，并盡可能早的排除表達(dá)水平低的干擾克隆
5. 準(zhǔn)確、自動化的挑取克隆，避免出現(xiàn)類似有限稀釋的錯誤
6. 高通量：5個(gè)熒光通道；8個(gè)獨(dú)立挑頭，200克隆/小時(shí)。
7. 高產(chǎn)量：和傳統(tǒng)有限稀釋方法相比，篩選克隆時(shí)間縮短一半，篩選到的克隆產(chǎn)量提高一倍。
8. 高靈活性：適用于多種細(xì)胞類型：貼壁細(xì)胞，懸浮細(xì)胞（雜交瘤，CHO，HEK，昆蟲細(xì)胞等）。
9. 自動化：成像，篩選，挑克隆過程自動化。
10.污染控制：封閉系統(tǒng)，內(nèi)部紫外燈照射；100級空氣過濾器；針頭洗槽，加熱干燥模塊。
應(yīng)用領(lǐng)域：
1. 抗體開發(fā)
（1）選擇的分泌細(xì)胞系
（2）細(xì)胞系開發(fā)用于生物治療
（3）去除不穩(wěn)定的克隆
2.抗體發(fā)現(xiàn)
（1）找出高產(chǎn)的雜交瘤細(xì)胞系用于抗體發(fā)現(xiàn)
（2）篩選抗原特異性雜交瘤或B細(xì)胞
3. 蛋白表達(dá)和生產(chǎn)
（1）挑取和開發(fā)表達(dá) GPCR 的細(xì)胞系
（2）利用報(bào)告蛋白篩選
（3）利用細(xì)胞表面標(biāo)記物篩選
（4）篩選分泌重組蛋白的細(xì)胞
4. 干細(xì)胞篩選
實(shí)驗(yàn)舉例：
雜交瘤細(xì)胞、CHO 細(xì)胞以及 HEK 293細(xì)胞是常見的宿主細(xì)胞用于表達(dá)重組蛋白藥物。哺乳動物細(xì)胞在半固體培養(yǎng)基(如 CloneMedia )中形成分離的細(xì)胞克隆。ClonePix 2 系統(tǒng)逐個(gè)挑取克隆從而在一步操作內(nèi)實(shí)現(xiàn)高概率的單克隆性。此外，熒光檢測試劑(如 CloneDetect )可以直接添加到半固體培養(yǎng)基中從而原位檢測分泌蛋白的含量或抗原特異性。ClonePix 2 系統(tǒng)利用白光成像檢測克隆形態(tài)和尺寸(反映單克隆性和生長速率)，再利用多通道熒光成像原位定量檢測分泌蛋白、細(xì)胞膜蛋白，或者抗原的特異性。儀器配套的軟件可以根據(jù)用戶定義的參數(shù)(如熒光強(qiáng)度)對克隆進(jìn)行排序，從而篩選出高表達(dá)的細(xì)胞克隆。隨后儀器可以準(zhǔn)確挑取排名靠前的細(xì)胞克隆，從而避免有限稀釋法帶來的誤差。
