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50301 ibidibiBoost™腺病毒轉(zhuǎn)導(dǎo)增強(qiáng)劑

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使用腺病毒轉(zhuǎn)導(dǎo)可以實(shí)現(xiàn)特定基因的表達(dá)或沉默。利用該技術(shù),可以獲得許多不同的細(xì)胞類型,并且轉(zhuǎn)導(dǎo)率可以高達(dá)100%。然而,潛在的感染機(jī)制有一些局限性,因?yàn)樗枰荏wCARCoxsackie Adenovirus Receptor)才能啟動(dòng)。該受體存在于許多人和嚙齒動(dòng)物細(xì)胞上,但并不存在于所有細(xì)胞類型中。為了解決這個(gè)問題,ibiBoost腺病毒轉(zhuǎn)導(dǎo)增強(qiáng)劑有助于將腺病毒顆粒偶聯(lián)到細(xì)胞膜上,從而更有效地轉(zhuǎn)導(dǎo)可接近的細(xì)胞類型和以前的非易感細(xì)胞類型。

ibiBoost專門開發(fā)用于改善腺病毒載體對(duì)通常難以轉(zhuǎn)導(dǎo)的細(xì)胞和細(xì)胞系的攝取。ibiBoost試劑是的,因?yàn)樗谙俨《窘Y(jié)合肽。由于這個(gè)因素,ibiBoost改變了腺病毒表面,使得所有允許細(xì)胞類型的腺病毒攝取得到改善,并且它允許轉(zhuǎn)導(dǎo)先前不能用于腺病毒轉(zhuǎn)導(dǎo)的細(xì)胞類型。與化學(xué)轉(zhuǎn)導(dǎo)增強(qiáng)劑不同,ibiBoost沒有毒性作用。如果超過500的高“感染多重性”(MOI)必須應(yīng)用于特定細(xì)胞類型,則特別推薦使用ibi-Boost。

該方案旨在使用ibiBoost改善腺病毒顆粒對(duì)細(xì)胞的攝取。


在實(shí)驗(yàn)前一天,使細(xì)胞接種,以便在轉(zhuǎn)導(dǎo)時(shí)達(dá)到50-70%的匯合。 根據(jù)下表將所需量的ibiBoost與培養(yǎng)基混合 添加對(duì)應(yīng)于所需MOI的腺病毒顆粒。 通過輕彈管混合溶液。 在室溫下孵育30分鐘,在搖床上孵育400rpm。 從細(xì)胞中取出培養(yǎng)基,并將混合物加入細(xì)胞中。 在標(biāo)準(zhǔn)細(xì)胞培養(yǎng)條件下孵育細(xì)胞4小時(shí)。 除去培養(yǎng)基,用緩沖液洗滌細(xì)胞兩次,并加入標(biāo)準(zhǔn)體積的培養(yǎng)


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