小鼠B細(xì)胞雜交瘤細(xì)胞W632細(xì)胞35.1型號(hào)ATCC上皮細(xì)胞樣貼壁生長
DMEM-H: Dulbecco’s Modified Eagle’s Medium (DME H-21 4.5g/Liter Glucose) 胎牛血清,10%消化3-5分鐘。1:3。3天內(nèi)可長滿。*培養(yǎng)基+8%DMSO公司細(xì)胞的簡潔信息:
(1)儲(chǔ)存:液氮。
(2)運(yùn)輸:干冰。
(3)用途:只可用于科研。
(4)第二代培養(yǎng)末期液氮凍存。
(5)小鼠B細(xì)胞雜交瘤細(xì)胞W632細(xì)胞35.1型號(hào)ATCC每凍存管細(xì)胞數(shù):>5×105 cells/1ml。
(6)不含有HIV-1、 HBV、HCV、支原體、細(xì)菌、酵母和真菌。
收到小鼠B細(xì)胞雜交瘤細(xì)胞W632細(xì)胞35.1型號(hào)ATCC后的處理:
1)收到細(xì)胞后,首先觀察瓶身是否完好(注意有無縫隙,裂痕)。
2)顯微鏡下觀察細(xì)胞的生長狀況,有無細(xì)胞漂浮。
3)用新潔爾滅消毒瓶口及瓶身。
4)打開瓶口,再次用新潔爾滅消毒瓶口(可能會(huì)有液體溢出,注意不要碰到液體),酒精燈烤瓶口消毒。
5)將培養(yǎng)液轉(zhuǎn)移至50ml離心管或廣口瓶中(若細(xì)胞漂浮嚴(yán)重,離心培養(yǎng)基,1000g*5分鐘,將離心后的培養(yǎng)基轉(zhuǎn)移至另一個(gè)大離心管中,留一點(diǎn)吹打細(xì)胞沉淀成懸液,回收細(xì)胞至原培養(yǎng)瓶),若漂浮不嚴(yán)重,亦離心一下。
6)在原培養(yǎng)瓶中留一部分原裝培養(yǎng)液,再補(bǔ)加自己新配的培養(yǎng)基至適當(dāng)容積,例如4ml,讓細(xì)胞適應(yīng)一下環(huán)境。 當(dāng)細(xì)胞長到70-80%,凍存大部分,小部分傳代。
RS20052 Colo205 人結(jié)腸癌 詢價(jià)
RS20053 Colo320DM 人結(jié)腸癌 詢價(jià)
RS20054 D341 Med 人髓母細(xì)胞瘤 詢價(jià)
RS20055 Daudi 人B淋巴細(xì)胞瘤 詢價(jià)
RS20056 DU145 人前列腺癌細(xì)胞 詢價(jià)
RS20057 G-401 人腎癌Wilms 詢價(jià)
RS20058 GLC-82 人肺腺癌細(xì)胞 詢價(jià)
RS20059 HCT116 人結(jié)直腸癌 詢價(jià)
RS20060 HCT-8 人結(jié)腸腺癌 詢價(jià)
RS20061 HEC-1B 人子宮內(nèi)膜癌細(xì)胞 詢價(jià)
RS20062 Hela 人宮頸癌細(xì)胞 詢價(jià)
RS20063 Hep G2 人肝癌細(xì)胞 詢價(jià)
RS20064 Hep-2 人喉癌細(xì)胞 詢價(jià)
RS20065 HL-60 人白血病細(xì)胞 詢價(jià)
RS20066 HOS 人骨肉瘤細(xì)胞 詢價(jià)
RS20067 HT-1080 人纖維肉瘤 詢價(jià)
RS20068 HT-29 人結(jié)腸腺癌細(xì)胞 詢價(jià)
RS20069 HuTu-80 人十二脂腸腺癌 詢價(jià)
RS20070 JEG-3 人絨癌細(xì)胞 詢價(jià)
RS20071 JEG-3/VP16 人絨癌細(xì)胞VP16耐藥株 詢價(jià)
RS20072 JEG-3/VP16-IL-2 人絨癌細(xì)胞VP16耐藥株IL-2轉(zhuǎn)染 詢價(jià)
RS20073 JEG-3/VP16-TNFa 人絨癌細(xì)胞VP16耐藥株TNFa轉(zhuǎn)染 詢價(jià)
RS20074 Jurkat D,E 人T淋巴瘤細(xì)胞轉(zhuǎn)基因細(xì)胞 詢價(jià)
RS20075 Jurkat E6-1 人T細(xì)胞淋巴瘤 詢價(jià) 0945-100ML 飽和酚 (pH 6.6/7.9) 生物技術(shù)級(jí) 100ML N/A 2 years PHENOL, SATURATED (pH 6.6/7.9)
0945-400ML 飽和酚 (pH 6.6/7.9) 生物技術(shù)級(jí) 400ML N/A 2 years PHENOL, SATURATED (pH 6.6/7.9)
0954-100MG * 美國藥典級(jí) 100MG 59-05-2 1 year METHOTREXATE
0961-100ML 蟻酸(甲酸) 高純級(jí) 100ML 64-18-6 4 years FORMIC ACID
0961-500ML 蟻酸(甲酸) 高純級(jí) 500ML 64-18-6 4 years FORMIC ACID
0966-100ML 酚:氯仿:異丙醇 25:24:1(pH 5.2) 生物技術(shù)級(jí) 100ML N/A 2 years PHENOL:CHLOROFORM, LOW pH
0966-400ML 酚:氯仿:異丙醇 25:24:1(pH 5.2) 生物技術(shù)級(jí) 400ML N/A 2 years PHENOL:CHLOROFORM, LOW pH
0973-100ML 雜交混合物,50%甲酰胺 100ML N/A 1 year HYBRIDIZATION COCKTAIL, 50% FORMAMIDE
0973-50ML 雜交混合物,50%甲酰胺 50ML N/A 1 year HYBRIDIZATION COCKTAIL, 50% FORMAMIDE
0975-25G 尿苷 超純級(jí) 25G 58-96-8 4 years URIDINE
0975-500G 尿苷 超純級(jí) URIDINE
0975-50G 尿苷 超純級(jí) 50G 58-96-8 4 years URIDINE
0975-5G分裝 尿苷 超純級(jí) URIDINE
0981-100ML 飽和酚 (pH 4.5) 生物技術(shù)級(jí) 100ML N/A 2 years PHENOL, SATURATED (pH 4.5)
0981-400ML 飽和酚 (pH 4.5) 生物技術(shù)級(jí) 400ML N/A 2 years PHENOL, SATURATED (pH 4.5)
0990-100MG 鹽酸* 美國藥典級(jí) 100MG 1404-93-9 2 years VANCOMYCIN HYDROCHLORIDE
0990-100MG分裝 鹽酸* 美國藥典級(jí) VANCOMYCIN HYDROCHLORIDE
0990-250MG分裝 鹽酸* 美國藥典級(jí) VANCOMYCIN HYDROCHLORIDE
0990-1G分裝 鹽酸* 美國藥典級(jí) VANCOMYCIN HYDROCHLORIDE
產(chǎn)品名稱:小鼠B細(xì)胞雜交瘤細(xì)胞W632細(xì)胞35.1型號(hào)ATCC
細(xì)胞術(shù)檢測(cè)樣品制備方法
A.小鼠B細(xì)胞雜交瘤細(xì)胞W632細(xì)胞35.1型號(hào)ATCC直接標(biāo)記抗體(FITC標(biāo)記抗體):
(1) 收集1×106個(gè)細(xì)胞,800rpm離心5min,4℃以上冷PBS洗一次。
(2) 用4%多聚甲醛1ml室溫固定40分鐘,800rpm離心5min去上清。加2ml PBS重懸洗滌細(xì)胞,800rpm離心5min。
(3) 用1ml含5% 人血清的 PBS 重懸細(xì)胞,冰上孵育10min,800rpm離心5min去上清。加入200ul含0.5%BSA 和飽和劑量的熒光標(biāo)記抗體(5×105個(gè)細(xì)胞/20ul抗體)的PBS ,避光冰上放置30min,離心棄上清。加入200ul 1% 多聚甲醛固定,待測(cè)即可。
(4) 用流式細(xì)胞儀檢測(cè)熒光值,每管計(jì)數(shù)10 000個(gè)細(xì)胞。[2]
B. 未標(biāo)記抗體間接免疫熒光標(biāo)記法:
(1)收集2×106個(gè)細(xì)胞,用冷的PBS 2ml 洗滌細(xì)胞一次,800rpm離心5min。
(2)用2ml 4%多聚甲醛室溫固定細(xì)胞40min,800rpm離心5min;2ml PBS重懸細(xì)胞,800rpm離心5min;
(3)用1ml含0.2%Triton-X100和5%血清的PBS重懸細(xì)胞,冰上放置10min,800rpm離心5min。
(4)加入飽和劑量未標(biāo)記抗體,冰上放置40min,800rpm離心5min,用2ml冷的PBS 重懸細(xì)胞,800rpm離心5min,洗去未結(jié)合一抗,重復(fù)一次。
(5)加入熒光標(biāo)記(FITC)標(biāo)記的二抗,冰上避光放置40min后,800rpm離心5min,去上清,PBS洗滌兩次。
(6)加入0.5ml 1%多聚甲醛重懸細(xì)胞;固定待測(cè)。
(7)流式細(xì)胞儀檢測(cè)熒光值,每管計(jì)數(shù)10 000個(gè)細(xì)胞。
C.細(xì)胞周期、細(xì)胞凋亡及DNA倍體分析樣品(PI染色)的制備:
(1)待測(cè)樣本制成單細(xì)胞懸液,然后200g離心5分鐘,棄上清。
(2)用4℃預(yù)冷的70%冷乙醇固定,4℃保存 ,至少固定18小時(shí)。
(3)調(diào)整細(xì)胞濃度為106細(xì)胞/毫升,取1毫升細(xì)胞懸液,用PBS洗三次,細(xì)胞重懸于1毫升PI染液中,37℃孵育30分鐘即可進(jìn)行流式分析。
(4)PI染液終濃度為50微克/毫升,RNase A終濃度為20微克/毫升。